Bakgrundsteknik
Cagrilintide är en ny långverkande acylerad amylinanalog. Som en icke-selektiv agonist av amylinreceptorn (AMYR) och den kalcitonin G-proteinkopplade receptorn (CTR), är det en cyklisk polypeptid som består av 38 aminosyror. Dess sekvens innehåller 38 aminosyror och ett par disulfidbindningar. Cagrilintide kan avsevärt minska kroppsvikten och matintaget och har potential inom fetmaforskning. Amylin är ett annat hormon relaterat till hunger och mättnad utanför GLP-1-signalvägen.
Cagrilintide kan minska energiintaget, reglera matval och preferenser, utöva en glukosreglerande effekt genom att samutsöndras med insulin, hämma postprandial glukagonfrisättning och fördröja magtömning. Det har uppenbara fördelar vid behandling av diabetes, fetma, metabolt syndrom, hjärt-kärlsjukdomar och andra aspekter, och har breda efterfrågan och tillämpningsmöjligheter.
Cagrilintides kemiska strukturformel
Grundläggande information
engelskaName：Cagrilintide
Företagsnummer：GT-F064
CAS：1415456-99-3
Sekvens：γ-Glu-Lys-Cys-Asn-Thr-Ala-Thr-Cys-Ala-Thr-Gln-Arg-Leu-Ala-Glu-Phe-Leu-Arg-His-Ser-Ser-Asn-As n-Phe-Gly-Pro-Ile-Leu-Pro-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Asn-Thr-Pro-NH2(Disulfidbridge:cys4-cys9)
MolekulärFormula：C194H312N54O59S2
MolekulärVikt：4409.01
Råvaror som används tillCagrilintide
Syntetisk väg
Cagrilintide Preparation Diagram
(1)Förberedelse avCagrilintidePeptidharts
Ta 1,5 mmol av den första skyddade aminosyran och 1,5 mmol HOBT, lös upp med en lämplig mängd DMF och kyl till 0~15°C; ta ytterligare 1,5 mmol DIC, tillsätt långsamt till DMF-lösningen av den skyddade aminosyran under omrörning och rör om reaktionen i 10 minuter vid 0~15°C för att erhålla en aktiverad skyddad aminosyralösning, som ställs åt sidan.
Ta 0,5 mmol aminoharts (substitutionsgrad 0,42 mmol/g), sväll det med DMF-lösning i 60 minuter, avskydda det med 20% Pip/DMF-lösning i 30 minuter, tvätta och filtrera för att erhålla hartset som ska reagera.
Tillsätt den aktiverade först skyddade aminosyralösningen till hartset som ska reageras, utför kopplingsreaktionen vid 25~35 ℃ i 120~300 minuter, filtrera och tvätta för att erhålla hartset som innehåller 1 skyddad aminosyra: Fmoc-Pro-Resin
Använd samma metod som ovan för att sekventiellt komma åt motsvarande 2:a till 38:e skyddade aminosyrorna eller fragmenten som nämns ovan:Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Gly-OH，Fmoc-Val-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Pro-OH·H2O，Fmoc-Pro-OH·H2O，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Ile-OH，Fmoc-Pro-OH·H2O，Fmoc-Phe-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-His(Trt)-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Pro-OH·H2O，Fmoc-Glu(OtBu)-OH，Fmoc-Ala-OH·H2O，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Gln(Trt)-OH，Fmoc-Ala-Thr(psi(Me,Me)pro)-OH，Fmoc-Cys(Trt)-OH，Fmoc-Ala-Thr(psi(Me,Me)pro)-OH，Fmoc-Thr(tBu)-OH，Fmoc-Asn(Trt)-OH，Fmoc-Cys(Trt)-OH，Fmoc-Lys(Boc)-OH，Fmoc-Glu-OtBu，Mono-tert-butyl eikosandioat, vilket ger 4,98 g karmegliptinpeptidharts
(2)Beredning av råoljaCagrilintide linjär peptid
Ta 4,49 g karfilzomib-peptidharts, tillsätt TFA-blandad lösning, förhållandet mellan den blandade lösningen är TFA:EDT/Tis/fenol/H2O = 87,5:2,5:5:2,5:2,5, och dosen är 8 ml per gram harts; rör om reaktionen vid 20~30°C i 3 timmar, filtrera reaktionsblandningen med en sandkärntratt, samla upp filtratet, tvätta hartset med en liten mängd TFA 3 gånger, kombinera filtraten, tillsätt MTBE för utfällning, tvätta fällningen med MTBE 3 gånger och pumpa torrt för att erhålla ett benvitt pulver av 08 g carbfil. peptid.
(3)Beredning av rå Cagrilintide cyklisk peptidlösning
Ta 0,50 g rå linjärCagrilintidpeptid, förbered en rå linjär peptidlösning vid en koncentration av 5,0 mg/ml, tillsätt 5 ml DMSO-lösning droppvis under omrörning och reagera vid 20~30 ℃ i 20 timmar för att erhålla en rå cyklisk cagrilintid-peptidlösning.
(4)Beredning av raffineradCagrilintidpeptid
Ta råoljanCarraglitid cyklisk peptidlösning och filtrera den med ett 0,45 μm blandat mikroporöst filtermembran；
Rena och förbered med högpresterande vätskekromatografi och samla uppCarragliptinfraktioner；
Högpresterande vätskekromatografi användes för buffertutbyte. Huvudtoppen efter buffertbyte uppsamlades och dess renhet detekterades genom analytisk vätskekromatografi. Huvudtopplösningarna efter buffertutbyte kombinerades, koncentrerades under reducerat tryck för att erhålla en vattenhaltig ättiksyralösning av karbotid, som frystorkades för att erhålla 152,18 mg raffinerad karbotid med en renhet av 99,58 %, en maximal enkel förorening på 0,09 %, ett totalt utbyte av 31 molekylvikter och 480 molekylvikter, 34 70 %.
HPLC diagram
MS diagram
Ovanstående exempel visar att, jämfört med steg-för-steg kopplingssyntesprocessen, har produkten erhållen med metoden som tillhandahålls av föreliggande uppfinning en renhet på mer än 99,0%, och varje enskild förorening är mindre än 0,1%, vilket förbättrar produktkvaliteten och det totala utbytet. Processen är enkel och lätt att kontrollera, har en hög grad av industrialisering och har omfattande praktiska värde- och tillämpningsmöjligheter.
Kontakta oss
Telefon: +86-18986204913
Tel: +86-027-83338163
E-post: info@cosperpharma.com
